一种代谢物液相色谱-质谱联用检测方法
专利摘要:本发明公开了一种代谢物液相色谱-质谱联用检测方法,其包括,待测样品首次上机检测;导入标准品检测数据库文件;准备待测样品首次检测结果下机数据;准备DP、CE组合梯度信息;设定峰高阈值;导出DP、CE优化结果;根据优化检测结果建立DP、CE优化数据库。本发明大大缩减常规项目DPCE优化条件分析、摸索耗时,本发明通过2-氯苯丙氨酸作为内标,准确监控样品采集情况,并采用17个混标作为质控品,监控仪器波动状态,本发明大大缩减了数据分析和时间,并实现了对采用过程和仪器波动的准确监控,提高了液相色谱-质谱串联检测的实验效率。
专利说明:
一种代谢物液相色谱-质谱联用检测方法
[0001] 技术领域
[0002] 本发明属于物质检测技术领域,具体涉及一种代谢物液相色谱-质谱联用检测方法。
[0003] 背景技术
[0004] 代谢组学是类似基因组学和蛋白质组学,对生物体内的代谢物进行大通量的定性定量额分析,并以此找出各个代谢物彼此之间的相互关系的一门学科。
[0005] 在利用液相色谱-质谱联用系统检测中,由于样品中物质含量高低的不确定性能,往往容易出现样品含量过高导致超出设备检测阈值的现象。通过调节各个目标物质的去簇电压(Declustering Potential,DP)和碰撞能量(collision Energy,CE)将检测物质阈值调整到有效检测范围内。而调整DP、CE不仅需要操作者有较好的实践经验,还需要人工进行大量的数据处理、组合,十分耗时耗力,特别是高通量样品检测时,每次实验均需平均耗时3~4小时进行数据分析,并且需要多次重复实验验证,直到找到DP、CE优化组合条件,另外,人工数据分析容易出错,造成实验反复失败,因此,如何快速有效的进行DP、CE组合优化,甚至实现不必经过反复多次实验即可直接得出最佳DP、CE组合是现有技术亟待解决的问题。
[0006] 发明内容
[0007] 本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊,而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
[0008] 鉴于上述的技术缺陷,提出了本发明。
[0009] 因此,作为本发明其中一个方面,本发明克服现有技术中存在的不足,提供一种代谢物液相色谱-质谱联用检测方法。
[0010] 为解决上述技术问题,本发明提供了如下技术方案:一种代谢物液相色谱-质谱联用检测方法,其包括,
[0011] 待测样品首次上机检测;
[0012] 导入标准品检测数据库文件;
[0013] 准备待测样品首次检测结果下机数据;
[0014] 准备DP、CE组合梯度信息;
[0015] 设定峰高阈值;
[0016] 导出DP、CE优化结果;
[0017] 根据优化检测结果建立DP、CE优化数据库。
[0018] 作为本发明所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法的一种优选方案:所述导入标准品检测数据库文件,包括导入标准品检测数据库文件的DP、CE信息。
[0019] 作为本发明所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法的一种优选方案:所述准备待测样品首次检测结果下机数据,包括获得首次上机质谱检测的原始下机积分结果数据。
[0020] 作为本发明所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法的一种优选方案:所述准备DP、CE组合梯度信息,包括根据所述标准品检测数据库文件给出DP、CE组合梯度信息。
[0021] 作为本发明所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法的一种优选方案:所述根据优化检测结果建立DP、CE优化数据库,包括,根据所述DP、CE优化数据库能够直接选取最优DP、CE条件,不需重复实验验证。
[0022] 作为本发明所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法的一种优选方案:还包括,将2-氯苯丙氨酸代替溶剂作为内标,在检测过程中,通过2-氯苯丙氨酸峰面积和保留时间反映实际样本的采集情况;所述2-氯苯丙氨酸浓度为1μg/mL。
[0023] 作为本发明所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法的一种优选方案:还包括,使用4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺)、对茴香胺、L-酪氨酸甲酯、3-氯苯胺、2,4-二甲基喹啉、磺胺吡啶、阿特拉津、磺胺多辛、DL-亮氨酸、N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯、6-苯基-2-硫脲嘧啶、N-(邻甲苯酰)甘氨酸、2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇、甘草次酸、黄烷酮、ε-己内酯、2-氨基吡啶的混合标样作为质控品,每次检测至少进两针质控品,根据谱图重叠情况分析检测仪器的状态。
[0024] 作为本发明所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法的一种优选方案:以质量比计,所述4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺):对茴香胺:L-酪氨酸甲酯:3-氯苯胺:2,4-二甲基喹啉:磺胺吡啶:阿特拉津:磺胺多辛:DL-亮氨酸:N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯:6-苯基-2-硫脲嘧啶:N-(邻甲苯酰)甘氨酸:2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇:甘草次酸:黄烷酮:ε-己内酯:2-氨基吡啶=1:0.5:0.5:2:1:0.4:0.1:0.1:0.2:0.5:0.5:1:1:0.1:0.5:2:0.2。
[0025] 作为本发明所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法的一种优选方案:所述4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺)的浓度为1μg/mL、对茴香胺的浓度为0.5μg/mL、L-酪氨酸甲酯的浓度为0.5μg/mL、3-氯苯胺的浓度为2μg/mL、2,4-二甲基喹啉的浓度为1μg/mL、磺胺吡啶的浓度为0.4μg/mL、阿特拉津的浓度为0.1μg/mL、磺胺多辛的浓度为0.1μg/mL、DL-亮氨酸的浓度为0.2μg/mL、N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯的浓度为0.5μg/mL、6-苯基-2-硫脲嘧啶的浓度为0.5μg/mL、N-(邻甲苯酰)甘氨酸的浓度为1μg/mL、2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇的浓度为1μg/mL、甘草次酸的浓度为0.1μg/mL、黄烷酮的浓度为0.5μg/mL、ε-己内酯的浓度为2μg/mL、2-氨基吡啶的浓度为0.2μg/mL。
[0026] 本发明的有益效果:本发明大大缩减常规项目DPCE优化条件分析、摸索耗时,此前单个物质检测DPCE参数优化调整数据分析耗时约3~4小时,使用该方法后单个项目DPCE优化调整省去该步骤,能够根据所述DP、CE优化数据库直接选取最优DP、CE条件,并且不需人工进行数据分析;本发自动化生成后续上机所需文件,避免人工处理可能带来的错误,保障了结果的准确有效性。在进行数据处理的同时,DPCE1界面工具会对项目中出现的峰高物质进行记录汇总建库,方便后期相同情况进行数据查询,达到数据积累使用的目的。本发明方法从筛选质谱检测峰值过高异常结果到构建新的DP、CE优化条件用于再次检测验证进行自动化,避免人为操作带来的错误;本发明将项目中检测的DPCE优化结果进行整理建库,能够根据数据库信息直接判断DPCE优化条件,无需经过实验验证。本发明通过2-氯苯丙氨酸作为内标,准确监控样品采集情况,并采用17个混标作为质控品,监控仪器波动状态,本发明大大缩减了数据分析和时间,并实现了对采用过程和仪器波动的准确监控,提高了液相色谱-质谱串联检测的实验效率。
[0027] 附图说明
[0028] 为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提下,还可以根据这些附图获得其它的附图。其中:
[0029] 图1为本发明DPCE优化step1界面图。
[0030] 图2为本发明DPCE优化step2界面图。
[0031] 图3为本发明方法MultiQuant软件参数设置示范。
[0032] 图4为本发明质控品在液相色谱-质谱联用仪器上出峰情况图。
[0033] 图5为本发明质控品在液相色谱-质谱联用仪器上的峰重叠情况图。
[0034] 图6为一次实验中传统混样法的色谱图。
[0035] 具体实施方式
[0036] 为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
[0037] 在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明,但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广,因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
[0038] 其次,此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例,也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
[0039] 本发明采用超高效液相色谱-三重四级杆/线性离子阱串联质谱(UPLC-QTRAP)技术,质谱仪为AB Sciex Q-TRAP 6500。
[0040] 本发明代谢物液相色谱-质谱联用检测方法包括,待测样品首次上机检测步骤;导入标准品检测数据库文件步骤;准备待测样品首次检测结果下机数据步骤;准备DP、CE组合梯度信息步骤;设定峰高阈值步骤;导出DP、CE优化结果步骤;根据优化检测结果建立DP、CE优化数据库步骤。
[0041] 本发明标准品检测数据库文件为待测物质标准品的液相色谱-质谱联用检测数据库,其中包括DP、CE优化信息,待测物质信息。
[0042] DP、CE组合梯度信息是根据标准品检测数据库的DP、CE数据从而给出组合梯度。峰高阈值根据质谱仪灵敏度设置。
[0043] 本发明创建了两个web版界面工具,包括DPCE优化step1(图1)和DPCE优化step2(图2)。其中DPCE优化step1主要针对样品首次检测下机结果进行处理,DPCE优化step2则针对除首次检测外的后续实验检测验证结果进行处理,并根据step2建立DP、CE优化数据库。
[0044] 在导入标准品检测数据库文件步骤、准备待测样品首次检测结果下机数据步骤、准备DP、CE组合梯度信息步骤、设定峰高阈值步骤后,DPCE优化step1会展示输入文件信息并进行统计,并会导出DP、CE优化结果数据。其中,结果数据中将导入数据划分成峰高合格的正负离子以及峰高不合格的正负离子,同时将不合格的正负离子以及相关项目信息整理导出,包括项目类型以及日期,用于后续数据统计。若实验数据均合格,则只导出峰高合格的正负离子信息。若存在峰高过高的物质,利用之前准备的DP和CE组合条件,按照实验上机检测的格式将峰高不合格的物质建立新的上机数据,用于后续实验上机检测验证。
[0045] 上机检测验证后将结果数据导入,并更新DP、CE组合条件,点击DPCE优化step2界面的输入文件按钮输入上述文件,再导入项目对应的数据库文件,并选择对应数据库类型,后端程序会对结果数据进行处理,包括:1、对验证结果中峰高不合格物质的再次筛选,并结合更新后的DP和CE组合条件生成新的上机格式文件;2、对验证结果中峰高合格的物质进行筛选提取,并将项目编号、样本中第一次的DP和CE条件及对应的峰高值、再次检测合格后的DP和CE条件及对应的峰高值和当天日期,一起整理合并到后端服务器中的DP、CE优化数据库文件中;当再次进行相关物质检测时,通过数据库中记录的结果,查询到峰高异常时峰高值接近的情况,直接选取对应的检测合格时的DP、CE参数即可,因此无需针对该物质的DP、CE条件再次实验验证。
[0046] 本发明大大缩减常规项目DPCE优化条件分析、摸索耗时,此前单个物质检测DPCE参数优化调整数据分析耗时约3~4小时,使用该方法后单个项目DPCE优化调整省去该步骤,能够根据所述DP、CE优化数据库直接选取最优DP、CE条件,并且不需人工进行数据分析;本发明自动化生成后续上机所需文件,避免人工处理可能带来的错误,保障了结果的准确有效性。在进行数据处理的同时,DPCE1界面工具会对项目中出现的峰高物质进行记录汇总建库,方便后期相同情况进行数据查询,达到数据积累使用的目的。本发明方法从筛选质谱检测峰值过高异常结果到构建新的DP、CE优化条件用于再次检测验证进行自动化,避免人为操作带来的错误;本发明将项目中检测的DPCE优化结果进行整理建库,能够根据数据库信息直接判断DPCE优化条件,无需经过实验验证。
[0047] 为了监控检测过程中样品采集情况对实验结果的影响,本发明选用2-氯苯丙氨酸作为内标,用水作为溶剂配制成1μg/mL的内标提取液,用内标2-氯苯丙氨酸提取液代替纯有机溶剂对实验样本进行提取,保证每个样本中内标的浓度一致,上机采集数据,在数据采集过程中,通过MultiQuant软件参数设置,查看内标峰面积和保留时间,通过内标的采集情况,反映实际样本的采集情况,内标异常的个别样本,再打开对应的采集数据查看,数据异常的进行重采。
[0048] MultiQuant软件参数设置:删除除内标以外的其它物质;生成所有样本内标的结果表格;选中面积一列,点击creates a metric plot,生成面积折线图,将折线图纵坐标改成百分比的形式,添加一条代表内标面积平均值横线,样本内标面积在平均值RSD上下10%范围内,认为样本数据采集正常,超出10%再返回数据采集软件查看样本采集数据,异常样本重新提交采集;选中保留时间一列,点击creates a metric plot,生成保留时间折线图,偏差超过0.1的返回数据采集软件查看样本采集数据,异常样本重新提交采集。
[0049] 本发明从众多物质中经过反复筛选,选择1μg/mL的2-氯苯丙氨酸水溶液作为内标,发现它在正负离子模式下都能够出峰且峰型好,并且不容易对样品中的待测物质产生干扰,采用本发明方法能够准确监测样本的采集情况,且不会发生遗漏,适用于检测血清、尿液、组织、细胞等样品作为内标质控品,例如,当检测样品在加样过程中掺入气泡时,会造成该样品体积减少,造成出峰响应降低,使得最终该样品的定量不准确,现有技术方法无法监控到这一技术问题,采用本发明内标质控品后,当某一样品掺入气泡时,该样品中加入的内标的出峰响应也会降低,因此能够准确发现该采集情况不佳的样品。本方法只需要一个2-氯苯丙氨酸水溶液作为内标,代替样品原本的有机溶剂,再利用软件的参数设置功能,通过内标的峰面积和保留时间即可快速判断样本的采集情况,简单、易操作、成本低。
[0050] 而当选择其他物质作为内标,例如3-碘化酪氨酸、十五氟辛酸、三氯蔗糖、3-氯苯胺、十三烷酸、甘氨酸、苯甲酸、琥珀酸等时,由于其不稳定、或正负离子模式下影响差别太大、或样品物质易产生干扰、检测重复性不佳,因此不适于作为内标。
[0051] 图3为本发明方法MultiQuant软件参数设置。从图3可以看出,本发明采用1μg/mL2-氯苯丙氨酸的低浓度水溶液作为内标,其多次重复实验的色谱峰面积RSD均小于3%,重复性非常好。
[0052] 为了监控检测过程中仪器运行状态正常与否,本发明采用超高效液相色谱-三重四级杆/线性离子阱串联质谱(UPLC-QTRAP)技术,质谱仪为AB Sciex Q-TRAP 6500,分析软件为Multi Quant,本发明代谢组学检测用质控品由经过筛选的17个混标组成,17个混标的溶剂为70%的甲醇水,本发明的用质控品17个标样及其使用终浓度见表1:
[0053] 表1
[0054]

[0055]

[0056]

[0057] 本发明适用于检测人的尿液、血清、组织、细胞等样品,以检测人血清为例,17个混标检测的液相质谱条件为:17个混标物质的溶剂为:70%甲醇水溶液;色谱柱:C18填料,柱子品牌Wates ACQUITY HSS T3,i.d.2.1×100mm,1.8um;流动相A:0.04%乙酸/超纯水;流动相B:0.04%乙酸/乙睛;柱温:40℃;流速:0.35ml/min;进样量:1uL;流动相梯度如下:
[0058]

[0059] 质谱条件:质谱参数信息为:
[0060]

[0061]

[0062] 离子对信息为:
[0063]

[0064] 采用上述相同色谱条件,用10次独立的实验验证本发明17个混标质控品与现有技术采用将待测样品混合的传统方法的质控稳定性,每次独立实验设置三组实验:17个混标质控品组、传统混样法组和利血平参照组,每次独立实验的17个混标质控品组、传统混样法组、利血平参照组均分别设置4个重复检测。传统混样法组采用50名健康人的血清样本等体积混合,单一药物利血平作为参照物,每次独立实验的4个重复检测中,计算该测试样品4个重复检测的色谱峰面积,若色谱峰面积的RSD在10%以内则认为对于该测试样品的检测过程实验状态稳定、重复性好,若RSD在10%~20%认为稳定性一般,RSD大于20%认为不稳定、重复性差,实验结果见下表:
[0065]

[0066] 在10次实验中,每次实验的4次重复检测中,参照物利血平的RSD均在10%以内,说明在利血平检测区段仪器状态稳定(利血平保留时间约1.5min);同时,17个混标质控品组的RSD均在10%以内,由于17个混标质控品的保留时间分散在0~11min,说明该10次实验中,在保留时间0~11min的仪器状态均为稳定。
[0067] 而在其中一次的独立实验中,传统混样法组的4个重复血清样品检测的峰面积RSD大于20%,保留时间分散在0.5~6.5min,以上数据表面,在该次实验中,在保留时间0.5~6.5min区段内,仪器的状态较稳定,但采用传统混样法却出现了RSD大于20%、实验重复性不佳的情况,该次实验传统混样法的色谱图见图6所示,经过分析,传统混样法组的混样质控品由于血清样品发生了降解,因此造成重复性不佳,因此,虽然此时仪器状态较稳定,传统混样法组却表现出RSD大于20%、实验重复性不佳。此时,根据传统混样法组出现的RSD大于20%的结果无法准确判定是仪器状态不稳定造成还是样品本身问题造成。而采用本发明17个混标质控品的质控方法由于17个物质性质稳定、不易发生降解、17个物质相互不会干扰信号、色谱峰分离好,且保留时间分散在0~11min,能够准确反应该检测区段内的仪器运行状态,适用于保留时间在0~11min的血清、尿液等样品中氨基酸、核酸、苯及其衍生物、胺类、黄酮类、萜类、醇类、内酯、吡啶等物质的检测(按照上述色谱条件,血清、尿液样品的保留时间在11min以内)。
[0068] 17个混标质控品的质谱响应在1*10^6~3*10^7之间,属于所用测试仪器最佳响应范围,17个标样化合物结构稳定,不易挥发、变质。
[0069] 在数据采集过程中通过前后采集的数据总离子流色谱图重叠情况判断仪器波动情况,色谱图重叠较好说明仪器稳定,重叠不好则通过重叠情况判断仪器状态,例如保留时间重叠不上说明可能是柱压或柱温不稳定,峰高重叠不上说明可能是色谱柱堵塞或质谱污染等。
[0070] 本方法的17个质控标样来源于不同的物质类别,能够反映仪器对不同类别物质的响应是否稳定,在代谢组学数据采集过程中穿插采集,若两针混标总离子流色谱图重叠图若重叠很好则表明仪器稳定,重叠不好则根据重叠图情况初步判断仪器不稳定的原因。本发明混标质控品十分稳定,且配制简单,用量少,成本低。本发明质控品及其质控方法适用于尿液、血液等质谱、色谱的代谢组学检测质控。经过针对不同种类物质的多次重复检测证明,采用本发明质控品能够精准的反应色谱仪或质谱仪的仪器状态(仪器是否稳定、柱压、柱温是否稳定、柱子是否有堵塞、是否有污染等)以及待测样品的状态,经过数百次实验验证,本发明17个混标质控品对仪器状态稳定与否的判断准确度达到100%。
[0071] 综上,本发明大大缩减常规项目DPCE优化条件分析、摸索耗时,此前单个物质检测DPCE参数优化调整数据分析耗时约3~4小时,使用该方法后单个项目DPCE优化调整省去该步骤,能够根据所述DP、CE优化数据库直接选取最优DP、CE条件,并且不需人工进行数据分析;本发自动化生成后续上机所需文件,避免人工处理可能带来的错误,保障了结果的准确有效性。在进行数据处理的同时,DPCE1界面工具会对项目中出现的峰高物质进行记录汇总建库,方便后期相同情况进行数据查询,达到数据积累使用的目的。本发明方法从筛选质谱检测峰值过高异常结果到构建新的DP、CE优化条件用于再次检测验证进行自动化,避免人为操作带来的错误;本发明将项目中检测的DPCE优化结果进行整理建库,能够根据数据库信息直接判断DPCE优化条件,无需经过实验验证。本发明通过2-氯苯丙氨酸作为内标,准确监控样品采集情况,并采用17个混标作为质控品,监控仪器波动状态,本发明大大缩减了数据分析和时间,并实现了对采用过程和仪器波动的准确监控,提高了液相色谱-质谱串联检测的实验效率。
[0072] 应说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的精神和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
权利要求:1.一种代谢物液相色谱-质谱联用检测方法,其特征在于:包括,
待测样品首次上机检测;
导入标准品检测数据库文件;
准备待测样品首次检测结果下机数据;
准备DP、CE组合梯度信息;
设定峰高阈值;
导出DP、CE优化结果;
根据优化检测结果建立DP、CE优化数据库。
2.如权利要求1所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法,其特征在于:所述导入标准品检测数据库文件,包括导入标准品检测数据库文件的DP、CE信息。
3.如权利要求1或2所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法,其特征在于:所述准备待测样品首次检测结果下机数据,包括获得首次上机质谱检测的原始下机积分结果数据。
4.如权利要求1或2所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法,其特征在于:所述准备DP、CE组合梯度信息,包括根据所述标准品检测数据库文件给出DP、CE组合梯度信息。
5.如权利要求1或2所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法,其特征在于:所述根据优化检测结果建立DP、CE优化数据库,包括,根据所述DP、CE优化数据库能够直接选取最优DP、CE条件,不需重复实验验证。
6.如权利要求1或2所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法,其特征在于:还包括,将2-氯苯丙氨酸代替溶剂作为内标,在检测过程中,通过2-氯苯丙氨酸峰面积和保留时间反映实际样本的采集情况;所述2-氯苯丙氨酸浓度为1μg/mL。
7.如权利要求1或2所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法,其特征在于:还包括,使用4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺)、对茴香胺、L-酪氨酸甲酯、3-氯苯胺、2,4-二甲基喹啉、磺胺吡啶、阿特拉津、磺胺多辛、DL-亮氨酸、N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯、6-苯基-2-硫脲嘧啶、N-(邻甲苯酰)甘氨酸、2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇、甘草次酸、黄烷酮、ε-己内酯、2-氨基吡啶的混合标样作为质控品,每次检测至少进两针质控品,根据谱图重叠情况分析检测仪器的状态。
8.如权利要求7所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法,其特征在于:以质量比计,所述4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺):对茴香胺:L-酪氨酸甲酯:3-氯苯胺:2,4-二甲基喹啉:磺胺吡啶:阿特拉津:磺胺多辛:DL-亮氨酸:N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯:6-苯基-2-硫脲嘧啶:N-(邻甲苯酰)甘氨酸:2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇:甘草次酸:黄烷酮:ε-己内酯:2-氨基吡啶=1:0.5:0.5:2:1:0.4:0.1:0.1:0.2:0.5:0.5:1:1:0.1:0.5:2:0.2。
9.如权利要求8所述的代谢物液相色谱-质谱联用检测方法,其特征在于:所述4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺)的浓度为1μg/mL、对茴香胺的浓度为0.5μg/mL、L-酪氨酸甲酯的浓度为0.5μg/mL、3-氯苯胺的浓度为2μg/mL、2,4-二甲基喹啉的浓度为1μg/mL、磺胺吡啶的浓度为0.4μg/mL、阿特拉津的浓度为0.1μg/mL、磺胺多辛的浓度为0.1μg/mL、DL-亮氨酸的浓度为0.2μg/mL、N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯的浓度为0.5μg/mL、6-苯基-2-硫脲嘧啶的浓度为0.5μg/mL、N-(邻甲苯酰)甘氨酸的浓度为1μg/mL、2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇的浓度为1μg/mL、甘草次酸的浓度为0.1μg/mL、黄烷酮的浓度为0.5μg/mL、ε-己内酯的浓度为2μg/mL、2-氨基吡啶的浓度为0.2μg/mL。
公开号:CN110596278
申请号:CN201910999865.6A
发明人:唐堂 高猛 董学奎 王宏 郑彬 石坚
申请人:嘉兴迈维代谢生物科技有限公司
申请日:2019-10-21
公开日:2019-12-20
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